由于毛發(fā)基質(zhì)復雜、藥物濃度低等因素,毛發(fā)驗毒在法庭毒物分析中具有挑戰性。毛發(fā)驗毒過(guò)程包括了取樣、去污、水解、提取和儀器分析等多個(gè)環(huán)節,實(shí)驗室采用不同的毛發(fā)處理方法和分析方法,導致在分析結果上也存在差異。
缺少準確濃度的毛發(fā)控制樣品是毛發(fā)驗毒領(lǐng)域的難題。分析結果的準確性和可靠性依賴(lài)于質(zhì)量控制和校正方法，在進(jìn)行方法有效性驗證時(shí)應采用相同基質(zhì)的質(zhì)控樣品，以消除偏倚，增強準確性。實(shí)驗室的質(zhì)量控制也應采用相同基質(zhì)的控制樣品，以考察實(shí)驗室內部的精密度和實(shí)驗室間的一致性。
無(wú)論是浸泡法還是磨粉法制備頭發(fā)控制樣品，都無(wú)法對頭發(fā)中濫用藥物分析的整個(gè)過(guò)程進(jìn)行質(zhì)量控制。頭發(fā)的最外部為毛表皮，由無(wú)核的鱗狀角化細胞呈疊瓦狀而成，不同的人發(fā)質(zhì)不同，有的為多孔性，有的為少孔性。即使同一人的頭發(fā)之間，多孔性也存在差異。毒物容易進(jìn)入多孔性的頭發(fā)，同時(shí),也容易被清洗、釋放出。已有的酸水解實(shí)驗結果表明，同一頭發(fā)樣品不同時(shí)間取樣，結果存在較大差異。換言之，剪碎浸泡水解的方法不會(huì )造成假陰性結果，但可能使定量結果不準確。目前不能確定頭發(fā)的多孔性是影響此差異的主要因素，但是采用研磨粉碎處理頭發(fā)樣品，可以消除由多孔性引起的誤差。另一方面，剪碎后酸水解方法有其相對優(yōu)勢，簡(jiǎn)便實(shí)用，頭發(fā)基質(zhì)干擾少，為很多實(shí)驗室所接受，而采用頭發(fā)粉末樣品則無(wú)法考察酸水解方法的釋放程度和穩定性等因素。
可能影響萃取的分析參數有：粒度、萃取時(shí)間、能量溫度/振動(dòng)/超聲、溶劑種類(lèi)、溶劑體積和萃取步驟的頻率。通過(guò)粉碎頭發(fā)來(lái)減小顆粒大小，已被證明可以顯著(zhù)提高乙基葡萄糖醛酸苷和各種濫用藥物的提取率。
毒物可通過(guò)多種途徑進(jìn)人毛發(fā)，從應用的角度看，最主要的途徑為血液循環(huán)，學(xué)者也期望以此來(lái)推斷用藥時(shí)間。但實(shí)際上，其他入體途徑同時(shí)存在，導致毛干中的毒物帶不如理論上僅有血液循環(huán)途徑的清晰。毒物進(jìn)入毛發(fā)的速率與黑色素親和力、親脂性密切相關(guān)，堿性藥物更容易進(jìn)入毛發(fā)。
毛發(fā)驗毒的應用越來(lái)越廣泛，在進(jìn)行頭發(fā)分析的結果解釋時(shí)應考慮頭發(fā)顏色、頭發(fā)生長(cháng)速度、藥物進(jìn)入毛發(fā)的機制、藥物在毛干中的保留、穩定性等因素，結合毛發(fā)驗毒的去污處理、清洗標準、cut-off值、原藥與代謝物的比率等多原則進(jìn)行綜合判斷。毒物進(jìn)入毛發(fā)的機制也仍需不斷深化研究，以尋找區分主動(dòng)吸食與被動(dòng)污染的有效方法。
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